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pcr實驗室建設的要求

pcr實驗室建設的要求

什么是pcr實驗室建設的基本要求?

一、pcr實驗室建設的平面布置。

PCR擴增檢測實驗室原則上分為四個獨立的工作區:試劑儲存區及備用區,標本制備區,擴增反應混合物配制及擴增區。產物分析區。為了防止交叉污染,各工作區域在進入時都是嚴格按照單一的方向進行的,即只有試劑儲存區和準備區→樣品制備→擴增反應混合物的配制和擴增產物分析區。在實驗區域間,應采用傳送窗將試劑和樣品傳送。

二、實驗室的空調和通風系統和壓力控制設計。

pcr實驗室建設沒有嚴格的凈化要求,但為了避免各試驗區之間可能出現交叉污染,建議采用全送全排氣流組織。與此同時,應嚴格控制送、排風量,保證各試驗區域的壓力要求。

1.樣品準備區域。

在這一地區主要進行的操作是保存樣品.核酸(RNA.DNA)提取,儲存,儲存,添加到擴增反應管,檢測DNA合成。該地區的壓力梯度要求是:對相鄰區域進行正壓,以避免相鄰區域內空氣中污染物的進入。此外,由于氣溶膠對環境的污染,在加樣過程中應盡量避免對環境造成不必要的污染。

2.試劑儲藏和準備區域。

在實驗區域內,主要進行了試劑的配制、試劑的分裝、主反應混合物的制備。試樣所用的試劑和物料必須直接運到區內,不能通過其它區域。在本區儲存試劑原料,并在本區內配制成所需儲存試劑。對于風壓的控制,本地區并無嚴格的要求。

3.產物分析的擴展領域。

在這一地區,主要是對擴增片段的測定。該地區是主要的擴增產物污染源,因此該地區要求壓力梯度為負,以避免該地區擴增產物從該地區擴散到其他地區。

4.反應混合物的調配和擴展區域。

在這一地區主要進行的是DNA擴增。另外,該區還可以將制備的DNA模板(樣品處理區)和主反應混合液(試劑貯藏和準備區)制備為反應混合液,等等。本地區的壓力梯度要求是:在本區域內,采用負壓方式,避免本地區氣溶膠泄漏。應盡量減少因氣霧劑造成的污染而不必要的出行。

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